基因編輯技術全覽、解析及其在臨床與動物模型等研究中的應用研討會8月上海培訓班
時間：2023-08-26 09:00 至 2023-08-27 18:00
地點：上海
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基因編輯技術全覽、解析及其在臨床與動物模型等研究中的應用研討會8月上海培訓班 已截止報名
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會議介紹
會議內(nèi)容 主辦方介紹
基因編輯技術全覽、解析及其在臨床與動物模型等研究中的應用研討會8月上海培訓班宣傳圖
2023年8月26-27日 上海·中興和泰酒店
【網(wǎng)絡學習班背景】
基因修飾研究領域從最初的基因打靶，到ZNF,TALENS，CRISPR/Cas9的問世與大方異彩，到Cas12，Cas13，Cas14，Base editing等新工具開發(fā)與應用，其整個領域發(fā)展脈絡、細節(jié)原理、應用與前景、未來發(fā)展趨勢和方向如何？是一個非常值得深入、系統(tǒng)、專業(yè)學習并探討的專業(yè)內(nèi)容。本次學習研討班，將詳細、深入講解和剖析各大基因編輯原理，操作流程，及其應用領域于前景（如臨床應用、動物模型應用等），通過理論結(jié)合實踐的講解與解析，以期讓參會者詳細、全面、深入掌握基因編輯工具，并能結(jié)合個人研究領域開展相應工作，學會更好地應用基因編輯工具，以及轉(zhuǎn)化相應成果。該研討會將會成為相關科研工作者、研發(fā)人員、興趣愛好者寶貴的知識培訓資源。
【講師背景】
李博士，副研究員。2014年博士畢業(yè)于德國慕尼黑工業(yè)大學（MAGNA CUM LAUDE）, 四川農(nóng)業(yè)大學獸醫(yī)碩士專業(yè)學位研究生校外指導教師。在CELL DEATH DIFFER、FRONT IMMUNOL、PLOS PATHOG、EMERG MICROBES INFEC等期刊上發(fā)表論文20余篇，主持完成國家自然科學基金等科研項目6項，獲日本實驗動物學會國際獎、ICLAS-CALAS國際青年獎、第三十屆上海市優(yōu)秀發(fā)明選拔賽銀獎、上海市人才發(fā)展資金、第三屆東方分子診斷學術會議優(yōu)秀論文二等獎。入選上海市科委專家人才庫、上海市實驗動物學會生物安全專業(yè)委員會委員、上海市實驗動物學會福利倫理專業(yè)委員會委員、是AMEM和《實驗動物與比較醫(yī)學》期刊青年編委、Military Medical Research (MMR) 期刊科學編輯、FRONT ONCOL、FRONT GENET、《中國實驗動物學報》、《中國比較醫(yī)學雜志》等雜志審稿專家。
【預期目標】
1、掌握基因打靶與基因編輯技術(ZNF,TALENs,CRISPR/Cas9)，能夠設計sgRNA靶點，構(gòu)建CRISPR/Cas9質(zhì)粒，用于基因敲除和敲入。
2、掌握CRISPR/Cas9質(zhì)粒轉(zhuǎn)染方法, 陽性細胞克隆篩選方法體系，基因編輯細胞系的建立，基因修飾情況分析方法。
3、掌握CRISPR/Cas9脫靶產(chǎn)生的原因，脫靶檢測方法，降低脫靶問題的方法
4、掌握CRISPR/Cas9的實際應用，構(gòu)建動物模型，對構(gòu)建基因修飾小鼠和基因修飾大動物（豬）有較深入了解。
5、掌握新基因編輯工具，如：Cas12，Cas13，Cas14，Base editing等。
6、掌握基因編輯研究領域前沿進展，基因編輯工具的拓展應用、臨床應用等，形成利用基因編輯工具結(jié)合自己研究內(nèi)容等科學思維。
7、Base editor 使用方法。
8、基因編輯工具用于檢測新型冠狀病毒、基因編輯工具有可能應用于新冠治療等應用的介紹與拓展
【收費標準】
會務費用：3000元/人，食宿自理
會議時間：2023年8月26-27日
會議地點：中興和泰酒店 上海市浦東新區(qū)科苑路866號
主辦方：上海統(tǒng)循會務咨詢有限公司
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【詳細日程】
基因編輯技術與動物模型構(gòu)建研討會日程 | |||
日期 | 時間 | 主題 | 詳細內(nèi)容 |
第一天上午 | 9:00-10:30 | 基因修飾技術簡介（一） | 基因打靶與基因編輯技術（ZNF, TALENs，CRISPR/Cas9）介紹 |
基因編輯、基因修飾、基因打靶、轉(zhuǎn)基因、基因敲除、基因敲入等專業(yè)領域概念梳理 | |||
CRISPR/Cas9結(jié)構(gòu)和特點 | |||
如何使用CRISPR/Cas9系統(tǒng)對特定基因進行敲除或定點插入（詳細方法步驟） | |||
拓展如何提高定點敲入效率等知識 | |||
10:30-10:45 | 休息 | ||
10:45-12:00 | 基因修飾技術簡介（二） | 基因編輯工具Cas12（Cpf1）、Cas13（C2C2）、Cas14的結(jié)構(gòu)、特點、工作原理 | |
如何使用Cas12（Cpf1）、Cas13（C2C2）、Cas14系統(tǒng)進行編輯 | |||
Cas12（Cpf1）、Cas13（C2C2）、Cas14與Cas9的比較 | |||
Cas9、Cas12（Cpf1）、Cas13（C2C2）、Cas14的應用和技術展望 | |||
上午現(xiàn)場答疑 | |||
12:00-13:30 | 午飯及午休 | ||
第一天下午 | 13:30-14:00 | CRISPR（sgRNA）設計方法和相關網(wǎng)站介紹 | sgRNA設計方法和相關網(wǎng)站介紹 |
CRISPR（sgRNA）的在線設計（在線互動設計演練） | |||
14:00-15:30 | 基因編輯實驗詳細操作 | gRNA oligos模板退火 | |
退火gRNA與線性化CRISPR/Cas9載體連接 | |||
連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化到大腸桿菌（DH5α），轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂板培養(yǎng)，CRISPR/Cas9重組子細菌克隆挑取，擴大化培養(yǎng)，鑒定陽性克隆 | |||
細胞轉(zhuǎn)染（Electroperation，Nuclefection，Nanofection，X-fection）等介紹與應用拓展 | |||
單細胞克隆篩選（有限稀釋法，濾紙法、環(huán)法、流式分選法等）方法介紹與應用拓展 | |||
15:30-15:45 | |||
15:45-17:00 | 利用CRISPR/Cas9技術編輯動物細胞系 | CRISPR/Cas9質(zhì)粒細胞轉(zhuǎn)染方法 | |
陽性細胞克隆篩選，基因修飾基因組DNA模板快速制備 | |||
目的靶基因的基因組DNA片段的PCR擴增，電泳檢測PCR產(chǎn)物 | |||
PCR產(chǎn)物退火變性，T7E1酶切，電泳鑒定基因修飾情況 | |||
17:00-17:30 | CRISPR/Cas9關鍵點總結(jié)、歸納、拓展 | 基因編輯關鍵知識點歸納、總結(jié)和提煉 | |
CRISPR/Cas9技術應用拓展（如CAB基因敲入方法等介紹） | |||
第二天上午 | 9:00-10:30 | 利用基因編輯技術構(gòu)建基因敲除或敲入小鼠 | 基因工程小鼠的詳細分類與比較 |
小鼠受精卵分離和培養(yǎng) | |||
CRISPR/Cas9系統(tǒng)顯微注射到小鼠受精卵 | |||
受精卵顯微注射后回輸?shù)酱心甘篌w內(nèi) | |||
PCR和T7E1分析和鑒定基因敲除小鼠（Founder） | |||
基因敲除小鼠基因敲除情況分析 | |||
CRISPR/Cas9構(gòu)建基因敲除小鼠詳細實驗流程歸納和總結(jié) | |||
10:30-10:45 | 休息 | ||
10:45-11:15 | 利用基因編輯技術構(gòu)建大動物模型 | 以大動物豬為例，進行詳細介紹基因編輯技術在大動物模型中的應用 | |
利用CRISPR/Cas9構(gòu)建基因修飾大型動物（豬）流程 | |||
基因修飾大型動物優(yōu)勢 | |||
利用CRISPR/Cas9構(gòu)建基因修飾大動物（豬）模型介紹 | |||
11:15-12:00 | 利用基因編輯技術構(gòu)建動物模型的詳細案例介紹 | 利用CRISPR/Cas9構(gòu)建基因修飾小鼠方法與相關基因修飾小鼠模型 | |
利用CRISPR/Cas9構(gòu)建基因修飾大動物（豬、猴）方法與相關基因修飾大動物模型 | |||
拓展基因編輯技術在其它物種中的應用 | 拓展基因編輯技術在其它物種中的應用 | ||
12:00-13:30 | 午飯及午休 | ||
第二天下午 | 13:30-15:00 | 實驗結(jié)果的點評與討論 | CRISPR/Cas9載體構(gòu)建討論 |
目的靶基因的基因組DNA片段的PCR擴增，電泳檢測PCR產(chǎn)物結(jié)果討論 | |||
PCR產(chǎn)物T7E1酶切，電泳鑒定基因修飾情況結(jié)果討論 | |||
Sanger測序鑒定基因編輯結(jié)果：CRISPR/Cas9質(zhì)粒陽性轉(zhuǎn)化子測序結(jié)果確認；Sanger測序閱讀基因編輯情況；如何從測序色譜圖中閱讀靶向突變等位基因型 | |||
15:00-15:30 | CRISPR/Cas9脫靶問題分析 | 脫靶產(chǎn)生的原因 | |
脫靶檢測方法 | |||
降低脫靶問題的方法 | |||
15:30-15:45 | |||
15:45-16:30 | 基因編輯領域進展大梳理與全面拓展 | 基因編輯技術的應用拓展介紹：SHERLOCK-V1、SHERLOCK-V2等應用于檢測方面的拓展，Base editing | |
結(jié)合當下新型冠狀病毒熱點，基因編輯工具用于檢測新型冠狀病毒、基因編輯工具有可能應用于新冠治療等應用的介紹與拓展 | |||
Cas系列突變體的介紹與應用 | |||
基因編輯的拓展應用（臨床應用：如應用于癌癥、杜氏營養(yǎng)肌不良綜合征、白內(nèi)障、消滅蚊子、植物中的應用、細菌中的應用等） | |||
基因編輯工具的倫理問題于討論 | |||
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